Pengembangan metode ELISA ora langsung kanggo deteksi sindrom diare akut babi coronavirus antibodi IgG adhedhasar protein spike rekombinan

Porcine Acute Diare Syndrome Coronavirus (SADS-CoV) yaiku coronavirus patogen enterik babi sing mentas ditemokake sing bisa nyebabake diare banyu ing babi bayi lan nyebabake kerugian ekonomi sing signifikan kanggo industri babi.Saiki, ora ana cara serologis sing cocog kanggo ngevaluasi efektifitas infeksi lan vaksin SADS-CoV, mula perlu banget nggunakake tes immunosorbent sing gegandhengan enzim (ELISA) sing efektif kanggo ngrampungake kekurangan kasebut.Ing kene, plasmid rekombinan sing nyatakake protein spike (S) SADS-CoV sing digabung karo domain IgG Fc manungsa dibangun kanggo ngasilake baculovirus rekombinan lan ditulis ing sel HEK 293F.Protein S-Fc diresiki nganggo resin protein G lan nahan reaktivitas karo antibodi Fc anti-manungsa lan anti-SADS-CoV.Banjur protein S-Fc digunakake kanggo ngembangake ELISA ora langsung (S-iELISA) lan ngoptimalake kondisi reaksi S-iELISA.Akibaté, kanthi nganalisa nilai OD450nm saka 40 SADS-CoV sera negatif sing dikonfirmasi dening immunofluorescence assay (IFA) lan Western blotting, nilai cut-off ditemtokake dadi 0.3711.Koefisien variasi (CV) saka 6 sera positif SADS-CoV ing lan ing antarane S-iELISA kabeh kurang saka 10%.Tes reaktivitas silang nuduhake yen S-iELISA ora duwe reaksi silang karo sera virus babi liyane.Kajaba iku, adhedhasar deteksi 111 sampel serum klinis, tingkat kebetulan sakabèhé IFA lan S-iELISA yaiku 97,3%.Tes netralisasi virus kanthi 7 nilai serum OD450nm sing beda nuduhake yen nilai OD450nm sing dideteksi dening S-iELISA ana hubungane positif karo tes netralisasi virus.Pungkasan, S-iELISA ditindakake ing 300 sampel serum peternakan babi.Kit komersial enterovirus babi liyane nuduhake yen tingkat positif IgG saka SADS-CoV, TGEV, PDCoV lan PEDV yaiku 81,7%, 54%, lan 65,3%., 6%, mungguh.Asil kasebut nuduhake manawa S-iELISA spesifik, sensitif, lan bisa direproduksi, lan bisa digunakake kanggo ndeteksi infeksi SADS-CoV ing industri babi.Artikel iki dilindhungi hak cipta.kabeh hak dilindhungi undhang-undhang.


Wektu kirim: Jun-22-2021